化学反应法：
草酸强还原性，可使高锰酸钾溶液褪色，丙二酸即热放二氧化碳可使石灰水变浑浊，丁二酸受热后不发生脱羧作用，而发生失水，形成稳定的五元环。
元素分析法：
原理：草酸，丙二酸，丁二酸，三者的碳氢比是不同的。
操作：分别取一定质量的三种物质，完全燃烧，分别用浓硫酸和碱石灰吸收产生的水和二氧化碳，根据浓硫酸和碱石灰增加的质量推算出原来物质的碳氢比就可以区分出三种物质。
金属钠反应。
原理介绍：三种物质的相对分子质量不同，所以相同质量的三种物质含有的羧基数不同。
操作方法：准确称量相同质量的三种物质，分别溶于水。向其中加入过量的金属钠，完全反应后测量产生氢气的体积，产生氢气最多的是草酸，产生氢气最少的是丁二酸。