黑曲霉麸皮培养法

2019-05-13

黑曲霉，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属真菌中的一个常见种。广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。是重要的发酵工业菌种，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等。有的菌株还可将羟基孕甾酮转化为雄烯。生长适温28℃左右，最低相对湿度为88%，能引致水分较高的粮食霉变和其他工业器材霉变。
曲霉菌丝是透明，有分枝和分隔，有分生孢子梗，能产生分生包子。曲霉素颜色多种，黑、黄、绿等。
黑曲霉素在斜面培养前期为白色絮状，是菌丝体、后期渐变为黑色、形成分生孢子。
黑曲霉素具有一般霉菌共同的特征，喜欢潮湿的环境，适宜生长的温度大概20-30度左右。
黑曲霉素发酵产生柠檬酸、实验中需要大量活化的孢子，其制备是用麸皮培养基中保藏的黑曲霉孢子，在新的麸皮培养基上适当的温度下活化并大量繁殖、从而生产大量活化孢子。
1. 将麸皮用纱布袋装好，使用自来水将麸皮反复揉洗至洗液澄清，挤掉部分水分，有水感而水不滴。洗净的麸皮装入500ml干净的锥形瓶中，装入量为瓶体1/5的位置，盖上几层纱布，用牛皮纸包装好。
2. 装好麸皮的培养基以高压蒸汽灭菌。
3. 取保藏的黑霉菌种，用接种环挑取少许菌落装入含有玻璃球的三角瓶中，加20ml无菌水，盖好瓶盖震荡几分钟，可得到孢子悬浮液。
4. 吸取孢子悬浮液5ml接入麸曲培养基中，摊开纱布、扎好、在掌心轻轻拍三角瓶，使孢子和培养基充分混合，放在30-32度恒温培养1天，在次拍打，至于35度下培养，每隔12-24小时摇动瓶子一次，待孢子长出后停止摇动瓶子，继续培养3-4天可成种曲。

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